分析Y迷宮的實驗步驟
點擊次數:1928 更新時間:2020-11-24
Y迷宮(Y-Maze)是方位記憶考察中常見的實驗范式。主要應用于動物的辨別性學習、工作記憶及參考記憶的測試。Y迷宮由三個*相同的臂和連接區組成。每個臂盡頭有食物提供裝置,根據分析動物取食的策略即進入各臂的次數、時間、正確次數、錯誤次數、路線等參數可以反映出實驗動物的空間記憶能力。通過燈光和電刺激,使動物形成回避條件反射,觀察和記錄動物的回避條件反應能力和空間辨別能力。分析和推斷動物的學習、記憶和空間認知等方面的能力。
1.篩(預)選
(1)將大鼠放入Y-迷宮箱中適應3~5min后,給予適當電擊至其對3臂均探索進入為止。選擇活躍,對電擊反應較敏感,逃避反應迅速者供測試用。淘汰反應過于遲鈍或特別敏感的大鼠。
(2)預選出達到電擊次數≤3次時連續2次正確反應的動物,即對電擊反應較敏感的大鼠供實驗用。
(3)在上述初步篩選的基礎上,通過正式迷宮訓練,淘汰達不到學會標準(學不會)的大鼠。
2.正誤判定的標準
大鼠受電擊后從起步區直接逃到安全區或通電后10s內一次性跑向安全區為“正確反應”,若逃到無燈光的任何另一臂,則記為錯誤反應。
3.達標(學會)標準
(1)連續10次中有9次或以上正確反應(正確反應率≥90%)定為學會標準。
(2)每個實驗日進行20次訓練測試,錯誤反應次數(errorsnumberEN)≤2次。全天總反應時間(totalreactiontimeTRT)≤120s作為判定大鼠學會的標準。因為EN反映大鼠反應的正確程度,TRT反映大鼠反應時間的長短,可綜合評價大鼠的學習記憶能力,因而此標準更為合理。
以上為每只大鼠達標(學會)標準,全組大鼠達標(學會)標準為全組正確率(學會動物數/該組動物總數×100%)達85%以上。
4.學習測試
實驗時先將大鼠放入迷宮中適應3~5min,然后再開始正式實驗。
(1)隨機休息法:安全區以無規則次序變換,以訓練大鼠辨別燈光刺激及安全的能力,大鼠受電擊后逃到安全區后,燈光繼續作用10~15s,熄燈后結束一次測試,大鼠所在支臂就作為下一次測試的起點,兩次測試時間間隔為30s或休息1min后再予以第2次測試,依次重復,測試至達連續9/10標準。
(2)隨機不休息法:安全區以無規則的次序變換開始時,對大白鼠所在支臂與另一支臂通電,動物在電擊下逃竄至燈光區后再保持l0s或30s為一次測試。然后動物所在支臂為下次測試的起始位置進行下一次測試。
(3)順序法:三臂末端按Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅰ臂輪流作為起步區或安全區。
以上方法還可以分為兩類:①每天固定訓練次數,一般是20次,連續訓練3~4d。大鼠一般都能達到學會標準。②不固定訓練次數,采用分段連續訓練法,即每訓練10次,休息1min,連續訓練直到學會為止,訓練在1d內完成。
5.記憶保持(再現)測試
學習測試24h、48h、1周、30d后,再以同樣方法測試至9/10標準,正確反應次數定為A,以A/10表示記憶的保持能力,此值越高說明記憶力越好?!?br type="_moz" />